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常识积累——生物基因工程

2021-10-11   来源:本站原创  浏览次数:

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基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。基因工程是在DNA分子水平上进行设计和施工的,又叫做DNA重组技术。

操作水平:DNA分子水平

原理:基因重组

优点:1.突破物种界限。 2.定向改造生物的遗传特性。

(一)基因工程的基本工具

1.“分子手术刀”——限制性核酸内切酶(限制酶)

(1)来源:主要是从原核生物中分离纯化出来的。

(2)功能:能够识别特定的核苷酸序列,并在特定的切点切割,因此具有专一性。

(3)作用的化学键:切割磷酸二酯键。

(4)结果:经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式:黏性末端和平末端。

2.“分子缝合针”——DNA连接酶

(1)作用:将两个具有相同粘性末端的DNA片段连接起来,形成重组DNA

(2)连接的化学键:磷酸二酯键

(3)与DNA聚合酶作用的异同:

DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核苷酸片段的末端,形成磷酸二酯键。

DNA连接酶是连接两个DNA片段的末端,形成磷酸二酯键。

3.“分子运输车”——运载体

(1)载体具备的条件:

①能在受体细胞中复制并稳定保存。

②具有一至多个限制酶切点,供外源DNA片段插入。

③具有标记基因,供重组DNA的鉴定和选择。

(2)最常用的载体是质粒,它是一种环状DNA分子。

(3)其它载体:噬菌体、动植物病毒

(二)基因工程的基本操作程序

第一步:目的基因的获取

1.从基因文库中获取(不知道目的基因的核苷酸序列的情况下采用)

2.人工合成。常用方法有:

(1)反转录法(已经获得mRNA的情况下采用)

(2)化学合成法(知道目的基因的核苷酸序列、基因比较小的情况下采用)

3.PCR技术扩增目的基因(知道目的基因两端的核苷酸序列、基因比较大的情况下采用)

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